问题：目视检查，具体哪种方法建议参照指南并基于风险评估确定，回收率应该得做

回答：

      NMPA GMP附录《确认与验证》：第三十九条 在清洁验证中，不能采用反复清洗至清洁的方法。目视检查是一个很重要的标准，但通常不能作为单一可接受标准使用。

      EU Guidelines for Good Manufacturing Practice for Medicinal Products for Human and Veterinary Use Annex 15- Qualification and Validation：10.2. A visual check for cleanliness is an important part of the acceptance criteria for cleaning validation. It is not generally acceptable for this criterion alone to be used. Repeated cleaning and retesting until acceptable residue results are obtained is not considered an acceptable approach.
     American Society for Testing and Materials (ASTM) E3106 Standard Guide for Cleaning Process Development and Validation "Using visual inspection alone for validation may be acceptable only when the risk is low and 100 percent of the equipment surface can be inspected under appropriate viewing conditions."
      参考PDA TR.29《清洁验证考虑要点》第5.12.章节：对生产表面的目检是确认残留去除的直观方法。通常目检在清洁验证方案中作为擦拭法或冲洗水法检测残留的一种补充。此时通常不需量化目检限度。如果没有擦拭取样或冲洗水取样，仅使用目视检查， 则需要量化指定表面上残留的目检限度，并说明具体观察条件。
       第6.5.章节：“目检回收率”这个过程实际上是确定一个定量的“目视检测限”。如果目检只是作为擦拭或冲洗取样的补充，则可以但不要求确定“目视检测限”。在指定观察条件下的目视检测限可以通过在设备材质试样上涂布不同浓度（μg/cm2）的残留物来确定，并需要一组训练有素的观察者来确定表面残留物明显可见时的最低残留水平。目视检测限的意义在于，如果在清洁验证方案中，在同样（或更严格）的观察条件下确定设备表面已目检洁净，则可认为实际残留水平低于目视检测限。适当的观察条件包括距离，光照以及观察角度。 目视检测限取决于残留物性质，表面性质（例如，不锈钢和PTFE）以及观察者的视力。文献报道的典型的目视检测限是1-4μg/cm2。对于目视检测限，不需要确定百分回收率；该研究的目的是确定残留物明显可见时的一个残留物水平，这样目视洁净的任何表面上残留水平都低于目视检测限。
      因此，对于目视检查，如果没有擦拭取样或冲洗水取样，回收率得做，即明确指定观察条件下的“目视检测限”。如GMP法规提到的目视检查作为单一可接受标准可能不被接受。仅通过目视检查来进行验证，这种做法可能在风险较低且所有设备表面都能在适当的观察条件下进行检查的情况下才是可行的。

1、根据你的实际情况选择；

据GMP 确认与验证 四十七条 应当采用擦拭取样和（或）对清洁最后阶段的淋洗液取样，或者根据取样位置确定的其他取样方法取样。擦拭用的材料不应当对结果有影响。如果采用淋洗的方法，应当在清洁程序的最后淋洗时进行取样。企业应当评估取样的方法有效性。

2、根据你的实际情况选择；

据章节CFDI 清洁验证技术指南章节5 清洁验证。

https://lib.shilinx.com/wiki/index.php?title=CFDI_%E6%B8%85%E6%B4%81%E9%AA%8C%E8%AF%81%E6%8A%80%E6%9C%AF%E6%8C%87%E5%8D%97_20250117

CFDI 药品共线生产质量风险管理指南 20230306中提到

<每批临床试验用药品生产后可采用目视并结合擦拭法和淋洗水法进行清洁效果确认，如出现检测结果超过预定的可接受标准时，可以采用重复清洁或优化改善清洁操作，再次取样检测残留物水平，确保残留水平满足预定的可接受标准。>

CFDI 药品共线生产质量管理指南征求意见稿 20211112中如下描述

《每批临床试验用药物生产后可采用目检并结合擦拭法或淋洗水法进行清洁效果确认，如出现检测结果超过预定的可接受标准时，可以采用重复清洁操作，再次取样检测残留物水平，确保残留水平满足预定的可接受标准。》

这个共线指南中，是针对在研产品，那么可能需要两种方式都做一下，因为在研产品做清洁确认时往往没有很多数据，只用一种方式风险稍高。

CFDI 清洁验证技术指南 20250117

5.3 取样方法

取样方法的选择取决于设备、待检测残留物的性质、残留物限度以及所需的分析方法。取样方法包括目视检查、擦拭取样、淋洗取样、接触碟取样等。上述方法各有其优点与局限性，在验证方案设计时，通常考虑采用多种取样方法相结合，例如目视检查加其他取样方法。

这里讲到清洁验证可以是目视加其他的方法，没有说必须采用擦拭和淋洗法一起用，但通常单纯的目视法不可取。但是一个设备取样时，如果有管道，不能擦拭取样的，往往需要结合淋洗取样。这个依据清洁验证或者清洁分析方法验证中取样位置的评估确定。

在就是回收率，如果需要确定取样方法，那么方法的取样回收率是需要做的。

问题1：在有什么国内外法规要求了，清洁验证必须要采用擦拭和淋洗两种取样方法了吗对于擦拭/淋洗取样，ISPE清洁验证指南7.2小节汇总相关官方法规指南关于擦拭和淋洗取样的描述如下：

1. PIC/S Validation Master Plan Installation and Operational Qualification Non-Sterile Process Validation Cleaning Validation, PI 006-3, September 2007：有两种采样方法被认为是可以接受的，直接表面采样（拭子法）和间接采样（使用淋洗水）。两种方法的组合通常是最可取的，尤其是在设备零件易于接近的情况下可以减轻直接表面采样的难度。
2. FDA Validation of Cleaning Processes：已经发现可以接受的两种通用采样方法。最理想的是直接对表面采样的方法，另一种方法是使用淋洗取样。
3. EMA – Annex 15: Qualification and Validation：采样应通过擦拭和/或冲洗或其他方式进行。取样材料和方法不得影响结果。回收率应该证明所采用的取样方法适用千从设备上产品接触的各类表面上进行取样。
4. FDA Human Drug CGMP Notes, “A Memo on Current Good Manufacturing Practice Issues on Human Use Pharmaceuticals,” Volume 6, Number 4, December 1998：虽然人们明白冲洗样本能够采集更大的表面区域，尤其是那些难以触及的区域，但就清洁验证而言，除非对残留物或污染物进行了直接测量，否则仅冲洗样本是不可接受的。冲洗样本的一个缺点是残留物或污染物可能不溶于水或者会附着在设备上。一些公司会在可行的情况下，在清洁验证过程中同时使用擦拭样本和冲洗样本。

       ISPE清洁验证指南7.2小节也给出建议：尽管可以仅将冲洗样品用于清洁验证研究，但最好将这些样品与直接取样方法（例如拭子取样）结合使用。冲洗样品本身可用于连续清洁验证（第3阶段）或清洁日常监控。

     《清洁验证技术指南》（2025.01）：取样方法的选择取决于设备、待检测残留物的性质、残留物限度以及所需的分析方法。取样方法包括目视检查、擦拭取样、淋洗取样、接触碟取样等。上述方法各有其优点与局限性，在验证方案设计时，通常考虑采用多种取样方法相结合，例如目视检查加其他取样方法。

       因此建议结合设备、待检测残留物的性质以及擦拭和淋洗取样的优缺点，如上面提到的残留物或污染物可能难溶于水或者会附着在设备内表面，擦拭和淋洗方式两者均选择。

问题2：做了这两种取样方法验证都必须要做取样回收率研究吗？

        参考ISPE清洁验证指南7.2小节描述：与擦拭采样一样，淋洗水的残留物检测也需对以下参数进行验证：线性、精密度、灵敏度、特异性、检测限（LOD）和定量限（LOQ）。残留物检测所需的淋洗回收率（RF）也必须提供。

       一些情况下可不进行回收率研究：对于一些可溶的且限度远低于溶解度的残留物（如作为清洁剂的氢氧化钠或磷酸等），不会与表面发生反应或被表面吸收，在充分评估的前提下，可不进行取样回收率研究。